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临床执业医师考试微生物学知识点精讲

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第八节 细菌感染的检查方法与防治原则

大纲要求：

1. 细菌学诊断：(1)标本的采集原则;(2)检验程序

2. 血清学诊断： 常用的血清学诊断方法。

3. 人工主动免疫与被动免疫：(1)特异性免疫的获得方式 (2)人工免疫的概念和常用的免疫制剂。

一 细菌学诊断

1. 标本的采集原则：重点

(1) 早期采集细菌标本，未应用抗生素前进行。

(2) 严格无菌操作，防止被其他微生物污染。

(3) 根据病种确定标本类型和采集部位。

(4) 做好标记，尽快送检。一般情况下冷藏送检，但奈瑟氏菌需室温送检

2. 检验程序，常用的五类病原学诊断方法

(1) 镜下检查：初步涂片染色，观察细菌结构

(2) 分离、培养、鉴定：进行生化反应鉴定

(3) 抗原检测：红细胞凝集、放免(ria)、酶免疫(eia)和免疫荧光

(4) 分子生物学：核酸杂交、pcr及基因芯片检测核酸

(5) 免疫学试验：检测宿主的抗体和细胞免疫指征

上述方法需要结合流行病学和临床体格检查综合作出判断

在适当的情况下，根据标本类型作出合理判断，选择性应用上述方法进行检查，提高检出率。

例题：标本采集原则不包括

a.未应用抗生素前进行b.严格无菌操作c.均需要低温送检d.根据病种确定标本类型和采集部位e.尽快送检

答案 c 解析 奈瑟氏菌需要常温下送检。

二 血清学诊断：用已知细菌或细菌抗原检测体液中有无相应抗体及抗体效价。

1. 酶联免疫吸附试验(elisa)、放射免疫试验(ria)及免疫荧光试验：运用不同标记检测血清中的特异性抗体或特异性抗原。

2. 蛋白印记实验 (western blot)：sds-page电泳分离混合蛋白条带，而后用特异抗体与之杂交，再加入酶或同位素标记的二抗，然后曝光显示蛋白条带，可用于验证elisa的正确与否，在aids中检测最常用。

3. 中和试验(nt)：先在血清中加入特异抗原或抗体发生中和，再检测血清中的目的抗体或抗原，如果是阴性，则中和试验阳性。如抗链o试验，用于风湿热

4. 试管凝集试验：抗体效价的检测。抗体效价高或恢复期血清抗体大于等于急性期的4倍，支持该病原体感染，如肥达氏反应用于伤寒副伤寒感染检测。

三 人工主动免疫与人工被动免疫

1. 对某种感染性疾病的特异性免疫可有病后天然免疫和人工免疫获得。

2. 人工主动免疫：用人工接种的方法给机体注射抗原性物质，使机体免疫系统因受抗原刺激而产生体液和细胞免疫应答的过程。接种后1-4周产生免疫应答，用于疾病预防。免疫制剂包括：减毒活疫苗、灭活疫苗、类毒素、亚单位疫苗和基因工程、dna疫苗。

3. 人工被动免疫：将含有特异性抗体的免疫血清或免疫细胞因子等制剂，直接注入机体，使之立即获得免疫力的过程。免疫制剂包括：抗毒素、丙种球蛋白、细胞免疫制剂等。

4. 常见免疫制剂

(1) 减毒活菌(疫)苗：如卡介苗、鼠疫减毒活疫苗、布鲁氏菌活疫苗、炭疽活菌。

(2) 灭活菌(疫)苗：百日咳灭活菌苗、伤寒灭活疫苗、霍乱灭活疫苗

(3) 类毒素：外毒素经0.3-0.4%甲醛处理，毒性消失，但抗原性保留，如白喉类毒素、破伤风类毒素，与灭活菌苗混合接种，有免疫佐剂效果

(4) 亚单位疫苗：用化学法提取病原菌中有效的免疫原成分支持，如脑膜炎球菌多糖疫苗和肺炎链球菌荚膜多糖疫苗

(5) 基因重组疫苗或基因工程疫苗：用工程菌表达微生物特异抗原成分，纯化制成疫苗，如乙肝重组疫苗

(6) dna疫苗，研究阶段

(7) 抗毒素：破伤风、白喉、肉毒抗毒素等

(8) 丙种球蛋白：人血丙种球蛋白，无特异性;特异性丙种球蛋白，人经某种疫苗免疫后取其特异丙种球蛋白，用于预防和治疗。

(9) 细胞免疫制剂，如细胞因子。

1-6为人工主动免疫制剂，后3种为被动免疫制剂。

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