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三、液固吸附色谱法 LSC
l 分离原理:按被分离组分的分子(溶质分子)与流动相分子(溶剂分子)争夺吸附剂表面活性中心的吸附能力的差别而分离。
l 硅胶为吸附色谱法最常用的固定相。
四、液液分配色谱法 LLC
(一)正相分配色谱法:流动相极性<固定相极性。
主要用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质。
反相分配色谱法:流动相极性>固定相极性。主要用于分离非极性至中等极性物质。
(二)LLC的固定相 最常用的固定相是化学健合相。
(1)非极性健合相:十八烷基硅烷健合硅胶(ODS,C18)、辛基硅烷健合硅胶(C8),在反相HPLC中最为常用。
(2)极性健合相:常用氨基和氰基硅烷键合相,即可用于正相色谱法,也可用于反相色谱法。多用于正相HPLC。
★★五、色谱系统适用性试验
目的:检查色谱系统在实验条件影响下是否符合要求
在各品种项下规定的色谱条件下,除固定相种类、流动相组成、检测器类型不得改变外,其余如色谱柱内径、色谱柱长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组成的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等,均可适当改变。以适应具体的色谱系统并达到色谱系统适用性试验的要求。
一、系统适用性试验
色谱系统适用性试验通常包括:理论踏板数、分离度、重复性和拖尾因子等四个指标。
(1)色谱柱的理论踏板数(n) n=5.54 (tR /Wh/2)2 tR, Wh/2统一单位
如测得n低于规定,应改变柱长或载体性能、重填色谱柱等以求达到。
(2)分离度 (R) R=2(tR2-tR1)/(W1+W2) 定量分析时R 3 1.5
记录纸速:转换分子、分母单位相同的参数。
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